研究報告
| 學年 | 100 |
|---|---|
| 學期 | 1 |
| 出版（發表）日期 | 2011-08-01 |
| 作品名稱 | 核醣核酸還原酶與甲型前胸素原在皮膚癌化過程中所扮演的角色 |
| 作品名稱（其他語言） | Biological Roles of Ribonucleotide Reductase M2 and Prothymosin Alpha during Skin Carcinogenesis |
| 著者 | 陳曜鴻 |
| 單位 | 淡江大學化學學系 |
| 描述 | 計畫編號：NSC100-2313-B032-001
 研究期間：201108~201207
 研究經費：1,000,000 |
| 委託單位 | 行政院國家科學委員會 |
| 摘要 | 本計畫是以分子生物與發育生物學的角度，探討皮膚癌化的機制與核苷酸還原酶 （ribonucleotide reductase M2, rrm2）、基因胸腺素原（prothymosin alpha, ptma）的基因、 Gli 轉錄因子、Shh 訊息傳遞途徑之關係。Shh 訊息傳遞途徑在人類與老鼠的基底細胞癌 中均有過度表現的現象。本實驗室先前發表之研究結果顯示，當過度表現Shh 訊息傳遞 途徑時，rrm2 及ptma 的基因表現均有顯著增加的趨勢。rrm2 與ptma 在正常生理功能 與病理癌化過程中皆扮演相當重要的角色，然而其參與皮膚癌化的分子機制至今仍然所 知有限。本研究欲利用斑馬魚胚胎及人類皮膚細胞探討皮膚癌化之分子機制，其研究結 果在學術上及應用上，都有助於了解皮膚癌化以及抗癌藥物治療皮膚癌的分子機制。這 些研究項目十分繁重，擬分三年來完成下列目標。 第一年計畫的目標在於建立 keratin18:rrm2:RFP 與keratin18:ptma:RFP 基因轉殖魚品 系，再利用分子生物方法驗證這些魚是否罹患皮膚癌。內容涵蓋：(1) 構築rrm2 或ptma 致癌蛋白分別與紅螢光蛋白（RFP）報導基因融合的表現質體；(2) 顯微注射法將上述 質體植入斑馬魚胚胎內；(3) 穩定遺傳品系的獲得；(4) 切片技術與組織染色；(5) 轉殖 品系的量產。 第二年計畫的目標在於選殖出 rrm2 與ptma 這兩個基因的上游調控區，並找出哪些 功能區可能是轉錄因子Gli 的結合位置。內容涵蓋：(1) keratin18:rrm2:RFP 與 keratin18:ptma:RFP 基因轉殖魚的飼育；(2) 切片技術與組織染色；(3) 抗體免疫螢光染 色實驗的建立；(4) 染色質免疫共同沉澱的操作；(5) 基因上游調控區的選殖。 第三年計畫的目標在於利用細胞轉染方式來直接證明 Shh、Gli 如何調控rrm2 與 ptma 而引起皮膚癌，甚至引發其他的癌症。內容涵蓋：(1) 細胞培養；(2) 切片技術與 組織染色；(3) 抗體免疫螢光染色實驗的建立；(4) 染色質免疫共同沉澱的操作；(5) 細胞轉染；(6) 冷光分析儀之操作；(7) 定點突變技術的操作。 |
| 關鍵字 | 斑馬魚; 皮膚癌; 核糖核酸還原酶; zebrafish; skin cancer; ribonucleotide reductase |
| 語言 | zh_TW |
| 相關連結 |
機構典藏連結 ( http://tkuir.lib.tku.edu.tw:8080/dspace/handle/987654321/103252 ) |